NCBI中primer-blast使用方法？pcr退火温度如何确定？
NCBI中primer-blast使用方法？
NCBI中primer-blast使用方法？
Q-PCR是生物学研究中的一项重要技术，用以检测基因表达的变化。其原料之一引物是需要研究者根据自己的研究对象进行设计的，这里介绍在NCBI里设计Q-PCR引物的方法。
pcr退火温度如何确定？
退火温度＝4×（G＋C）＋2×（A＋T）－（5～8） 只是粗算，有时不灵，但比较简便。
用primer5（or oligo6）计算，引物配对好后，primer5可以显示Tm，我认为这个值就是退火温度，我的经验再加2 or 3度最好。
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