oligo calc怎么看引物好坏?
为验证引物是好是坏,可采用以下方法:
1. 使用质谱仪对引物进行质量分析,确保质量符合预期。
2. 聚合酶链反应(PCR)扩大目标序列,然后进行电泳分析,看看是否有预期大小的片段。
3. 进行测序验证,使用引物扩展产品进行Sanger测序,并与目标顺序进行比较,以确认是否一致。
4. 如有条件,可进行实时荧光定量PCR,观察引物膨胀的效率和特异性。
5. 引物特性分析可采用引物设计软件,如TM值、2聚体形成等,确保引物设计合理。
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