如何利用Primer6.0设计引物？
1.首先，选择目的基因序列，对格式没有要求，只需复制目的基因序列即可。
2.打开File目录下的New，选择Sequence。这里的另一个Project选项是导入文件的方式，即以文件的形式保存目的基因，可以直接导入文件。一般来说，复制更方便。
3.打开Sequence后，会弹出粘贴框，只需粘贴刚复制的基因序列，然后点击下面的Add。
4.选择上面红蓝双向箭头的按钮进行引物设计。设计参数可在设计开始前更改，包括搜索的碱基范围、引物长度、碱基数、设计结果中显示的引物对数等。
5.设置参数后，单击下面的Search，软件开始分析设计，完成后，单击OK。下面将显示设计结果。
6.结果中，蓝色是前引物，红色是后引物。Rating是对引物的综合评价分数，上面也会显示引物的优缺点。最好的是Best，中间的是谷歌，最好的是谷歌。一般来说，引物是Best或谷歌，其他显示器不能使用。
7.右边有两个选项，All Primers可以查看可选的多对不同引物。您可以根据需要选择合适的位置和产品长度。选择后，您需要单击下面的Replace进行更换。
8.All Structers可以查看当前选定的引物结构，如发夹结构、引物二聚体和重复碱基。
9.选择引物后，单击下面的引物序列，然后右键弹出复制信息选项，然后导出设计好的引物。结果也可以以文件的形式直接导出。
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